AAT Bioquest 22828/22829 Cell Meter™膜聯(lián)蛋白V結(jié)合細(xì)胞凋亡測定試劑盒*藍(lán)色/*綠色熒光在405nm激發(fā)

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AAT Bioquest 膜聯(lián)蛋白V結(jié)合細(xì)胞凋亡試劑盒-常備現(xiàn)貨

美國 AAT Bioquest Inc.(前身是 ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學(xué)研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學(xué)家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學(xué)檢測領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AATBioquest 的產(chǎn)品幫助 quan shi jie 的科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué)，免疫學(xué)，細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest 會不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個領(lǐng)域的產(chǎn)品。

AAT Bioquest  22828  Cell Meter™ Annexin V 結(jié)合細(xì)胞凋亡檢測試劑盒 *在 405 nm 處激發(fā)的藍(lán)色熒光*  100 Tests

AAT Bioquest  22829  細(xì)胞計(jì)™膜聯(lián)蛋白 V 結(jié)合細(xì)胞凋亡檢測試劑盒 *在 405 nm 處激發(fā)的綠色熒光*  100 Tests

AAT Bioquest 膜聯(lián)蛋白V結(jié)合細(xì)胞凋亡試劑盒-常備現(xiàn)貨

AAT Bioquest  22828  Cell Meter™ Annexin V 結(jié)合細(xì)胞凋亡檢測試劑盒 *在 405 nm 處激發(fā)的藍(lán)色熒光*  100 Tests，產(chǎn)品說明：

我們的細(xì)胞計(jì)™檢測試劑盒是一套用于監(jiān)測細(xì)胞活力的工具。有多種參數(shù)可用于監(jiān)測細(xì)胞活力。該特定試劑盒旨在通過測量磷脂酰絲an酸（PS）的易位來監(jiān)測細(xì)胞凋亡。在細(xì)胞凋亡中，PS被轉(zhuǎn)移到質(zhì)膜的外小葉上。磷脂酰絲an酸在細(xì)胞表面的出現(xiàn)是細(xì)胞凋亡初始/中間階段的通用指標(biāo)，可以在觀察到形態(tài)變化之前檢測到。該試劑盒使用特異性結(jié)合PS的熒光膜聯(lián)蛋白V.膜聯(lián)蛋白V偶聯(lián)物已被證明可以選擇性結(jié)合PS。這種特殊的檢測試劑盒經(jīng)過優(yōu)化，可使用帶有太平洋藍(lán)色濾光片組的流式細(xì)胞儀監(jiān)測細(xì)胞凋亡。

組件

組分 A：Annexin V-iFluor™ 450（100X 儲備溶液）—1 瓶（200 μL/瓶）

組分B：測定緩沖液（4°C）—1 瓶 （50 mL）

組分C：100X碘化丙啶—1 瓶 （100 μL）

協(xié)議摘要

1.    用測試化合物制備細(xì)胞（200 μL/樣品）

2.    加入膜聯(lián)蛋白V-mFluor Violet™ 450測定溶液

3.    在室溫下孵育 30 - 60 分鐘

4.    使用帶 450/40 nm 濾光片（太平洋藍(lán)色通道）的流式細(xì)胞儀或帶 DAPI 濾光片組的熒光顯微鏡分析細(xì)胞

重要說明：在開始實(shí)驗(yàn)之前，在室溫下解凍100X碘化丙啶（組分C）。

實(shí)驗(yàn)方案樣本

用膜聯(lián)蛋白V-mFluor Violet™ 450制備和孵育細(xì)胞：

1.    用測試化合物處理細(xì)胞所需的時間（用星形孢菌素處理的Jurkat細(xì)胞為4-6小時）以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。

2.    離心細(xì)胞得到 1 - 5×10⁵細(xì)胞/管。

3.    將細(xì)胞重懸于 200 μL 檢測緩沖液（組分 B）中。

4.    向細(xì)胞中加入 2 μL 膜聯(lián)蛋白 V-mFluor 紫™ 450（組分 A）。

5.    自選：將 2 μL 100X 碘化丙啶（組分 C）加入壞死細(xì)胞細(xì)胞中。

6.    在室溫下孵育 30 至 60 分鐘，避光。

7.    在用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡分析細(xì)胞之前，加入 300 μL 測定緩沖液（組分 B）以增加體積。

8.    使用帶有太平洋藍(lán)通道的流式細(xì)胞儀或帶有DAPI濾光片組的熒光顯微鏡監(jiān)測熒光強(qiáng)度。

使用流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析：

1.    使用具有太平洋藍(lán)通道的流式細(xì)胞儀定量膜聯(lián)蛋白V-mFluor Violet™ 450結(jié)合。當(dāng)將碘化丙啶添加到細(xì)胞中時，使用 610/20 nm 濾光片（PE-德克薩斯州紅色通道）測量細(xì)胞活力。注意：膜聯(lián)蛋白V結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)分析不常規(guī)測試，因?yàn)樵诩?xì)胞分離或收獲過程中可能發(fā)生特定的膜損傷。然而，利用膜聯(lián)蛋白V對貼壁細(xì)胞類型進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)的方法先前已由Casiola-Rosen等人和van Engelend等人報(bào)道。

使用熒光顯微鏡進(jìn)行分析：

1.    孵育后移液細(xì)胞懸液，用測定緩沖液沖洗1-2次，然后用測定緩沖液重懸細(xì)胞。

2.    將細(xì)胞添加到用玻璃蓋玻片覆蓋的載玻片上。注意：對于貼壁細(xì)胞，建議直接在蓋玻片上培養(yǎng)細(xì)胞。用V-mFluor Violet™ 450孵育后，用測定緩沖液沖洗1-2次，然后將測定緩沖液加回蓋玻片中。在載玻片上倒置蓋玻片并可視化細(xì)胞。用V-mFluor Violet™ 2孵育后，細(xì)胞也可以固定在450%甲醛中，并在顯微鏡下觀察。

3.    使用DAPI濾光片組在熒光顯微鏡下用V-mFluor Violet™ 450分析凋亡細(xì)胞。當(dāng)將碘化丙啶添加到細(xì)胞中時，使用TRITC通道測量細(xì)胞活力。質(zhì)膜上的藍(lán)色染色表明V-mFluor Violet™ 450與細(xì)胞表面的PS結(jié)合。

AAT Bioquest  22829  細(xì)胞計(jì)™膜聯(lián)蛋白 V 結(jié)合細(xì)胞凋亡檢測試劑盒 *在 405 nm 處激發(fā)的綠色熒光*  100 Tests，產(chǎn)品說明：

我們的細(xì)胞計(jì)™檢測試劑盒是一套用于監(jiān)測細(xì)胞活力的工具。有多種參數(shù)可用于監(jiān)測細(xì)胞活力。該特定試劑盒旨在通過測量磷脂酰絲an酸（PS）的易位來監(jiān)測細(xì)胞凋亡。在細(xì)胞凋亡中，PS被轉(zhuǎn)移到質(zhì)膜的外小葉上。磷脂酰絲an酸在細(xì)胞表面的出現(xiàn)是細(xì)胞凋亡初始/中間階段的通用指標(biāo)，可以在觀察到形態(tài)變化之前檢測到。該試劑盒使用特異性結(jié)合PS的熒光膜聯(lián)蛋白V.膜聯(lián)蛋白V偶聯(lián)物已被證明可以選擇性結(jié)合PS。這種特殊的檢測試劑盒經(jīng)過優(yōu)化，可使用帶有太平洋藍(lán)色濾光片組的流式細(xì)胞儀監(jiān)測細(xì)胞凋亡。

組件

組分 A：Annexin V-iFluor™ 450（100X 儲備溶液） 1 瓶（200 μL/瓶）

組分B：測定緩沖液（4°C）    1 瓶 （50 mL）

組分C：100X碘化丙啶     1 瓶 （100 μL）

1.    用測試化合物制備細(xì)胞（200 μL/樣品）

2.    加入膜聯(lián)蛋白V-mFluor Violet™ 450測定溶液

3.    在室溫下孵育 30 - 60 分鐘

4.    使用帶 450/40 nm 濾光片（太平洋藍(lán)色通道）的流式細(xì)胞儀或帶 DAPI 濾光片組的熒光顯微鏡分析細(xì)胞

重要說明：在開始實(shí)驗(yàn)之前，在室溫下解凍100X碘化丙啶（組分C）。

實(shí)驗(yàn)方案樣本

用膜聯(lián)蛋白V-mFluor Violet™ 450制備和孵育細(xì)胞：

1.    用測試化合物處理細(xì)胞所需的時間（用星形孢菌素處理的Jurkat細(xì)胞為4-6小時）以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。

2.    離心細(xì)胞得到 1 - 5×10⁵細(xì)胞/管。

3.    將細(xì)胞重懸于 200 μL 檢測緩沖液（組分 B）中。

4.    向細(xì)胞中加入 2 μL 膜聯(lián)蛋白 V-mFluor 紫™ 450（組分 A）。

5.    自選：將 2 μL 100X 碘化丙啶（組分 C）加入壞死細(xì)胞細(xì)胞中。

6.    在室溫下孵育 30 至 60 分鐘，避光。

7.    在用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡分析細(xì)胞之前，加入 300 μL 測定緩沖液（組分 B）以增加體積。

8.    使用帶有太平洋藍(lán)通道的流式細(xì)胞儀或帶有DAPI濾光片組的熒光顯微鏡監(jiān)測熒光強(qiáng)度。

使用流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析：

1.    使用具有太平洋藍(lán)通道的流式細(xì)胞儀定量膜聯(lián)蛋白V-mFluor Violet™ 450結(jié)合。當(dāng)將碘化丙啶添加到細(xì)胞中時，使用 610/20 nm 濾光片（PE-德克薩斯州紅色通道）測量細(xì)胞活力。注意：膜聯(lián)蛋白V結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)分析不常規(guī)測試，因?yàn)樵诩?xì)胞分離或收獲過程中可能發(fā)生特定的膜損傷。然而，利用膜聯(lián)蛋白V對貼壁細(xì)胞類型進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)的方法先前已由Casiola-Rosen等人和van Engelend等人報(bào)道。

2.    使用熒光顯微鏡進(jìn)行分析：

3.    孵育后移液細(xì)胞懸液，用測定緩沖液沖洗1-2次，然后用測定緩沖液重懸細(xì)胞。

4.    將細(xì)胞添加到用玻璃蓋玻片覆蓋的載玻片上。注意：對于貼壁細(xì)胞，建議直接在蓋玻片上培養(yǎng)細(xì)胞。用V-mFluor Violet™ 450孵育后，用測定緩沖液沖洗1-2次，然后將測定緩沖液加回蓋玻片中。在載玻片上倒置蓋玻片并可視化細(xì)胞。用V-mFluor Violet™ 2孵育后，細(xì)胞也可以固定在450%甲醛中，并在顯微鏡下觀察。

5.    使用DAPI濾光片組在熒光顯微鏡下用V-mFluor Violet™ 450分析凋亡細(xì)胞。當(dāng)將碘化丙啶添加到細(xì)胞中時，使用TRITC通道測量細(xì)胞活力。質(zhì)膜上的藍(lán)色染色表明V-mFluor Violet™ 450與細(xì)胞表面的PS結(jié)合。

產(chǎn)品訂購信息：

AAT Bioquest  22828  Cell Meter™ Annexin V 結(jié)合細(xì)胞凋亡檢測試劑盒 *在 405 nm 處激發(fā)的藍(lán)色熒光*  100 Tests

AAT Bioquest  22829  細(xì)胞計(jì)™膜聯(lián)蛋白 V 結(jié)合細(xì)胞凋亡檢測試劑盒 *在 405 nm 處激發(fā)的綠色熒光*  100 Tests